用价格便宜的PEI的试剂瞬时转染细胞通过胞吞作用进行表达。一般在2-3周内可以完成表达纯化的全部过程。
哺乳细胞蛋白表达
哺乳动物细胞表达系统能够为重组人源蛋白提供最接近于天然状态的翻译后修饰,在活性方面远胜于原核表达系统及酵母、昆虫细胞等真核表达系统。
哺乳动物细胞表达系统
对于要求复杂折叠机制、辅助因子,特别是翻译后修饰的蛋白研究,哺乳细胞体系具有明显优势。
哺乳动物细胞表达系统能够为重组人源蛋白提供最接近于天然状态的翻译后修饰,在蛋白表达过程中会形成接近天然蛋白的蛋白质折叠和聚合,具备活性蛋白所必须的空间结构和修饰。这对于要求复杂折叠机制、辅助因子,特别是翻译后修饰的蛋白研究是很有帮助的。由哺乳动物细胞翻译后再加工修饰产生的外源蛋白质,在活性方面远胜于原核表达系统及酵母、昆虫细胞等真核表达系统,更接近于天然蛋白质。这一特性使得哺乳动物细胞表达系统在重组蛋白药物,特别是治疗性重组单抗药物的研发和生产中有最为广泛的应用。
需要长时间的进行筛选,最终获得细胞株,稳定高表达目的蛋白,适用于大规模生产蛋白
平台质粒与细胞
平台常备多种哺乳表达质粒与配套细胞,可按蛋白类型与产量需求选择。
| 质粒 | 细胞 |
|---|---|
| pcDNA3.1 | 293F |
| pMLink-GFP | CHO |
| pMLink-Strep-Flag | — |
| pCAG/pCAG-His | — |
| pCMV-N-flag | — |
| Pvax-signal | — |
细胞培养设施与反应器
平台配备多间细胞间与多种规格生物反应器,支持大规模悬浮细胞培养。
平台目前有E202,E203,E205三间细胞间,总面积达120多平米,提供二氧化碳摇床28台,生物安全柜7台,可以进行大规模悬浮细胞培养。
此外,平台还配备了5升,10升的艾本德celligen生物反应器,可以进行哺乳类,动/植物及昆虫细胞的 批次,流加或连续灌注培养。
平台还配备了20/50升赛托里斯的WAVE生物反应器,可以使细胞培养更加快速、灵活和更具有成本效益。一次性使用的cultibag被放置在一个摇摆平台上,形成波浪式摆动,这种轻柔的波浪运动可以防止沉淀,提供高的溶氧效率且不产生气泡,WAVE生物反应器系统可以广泛地应用于单克隆抗体工艺,以及结合各种各样的微载体对贴壁依赖型细胞进行培养。







技术交流
部分客户署名公司发表文章:
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Malaria oocysts require circumsporozoite protein to evade mosquito immunity.
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Identification and functional characterization of a novel BEL1-LIKE homeobox transcription factor GmBLH4 in soybean.
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Nanopore efficiently identifies hepatitis D virus antigens in vitro assay.
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Discovery of Clinical Candidate (5-(3-(4-Chlorophenoxy)prop-1-yn-1-yl)-3-hydroxypicolinoyl)glycine, an Orally Bioavailable Prolyl Hydroxylase Inhibitor for the Treatment of Anemia.
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Int J Mol Sci. 2023 May 11;24(10):8587, doi: 10.3390/ijms24108587
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2018 Mar;93(5):917-930, doi: 10.1111/tpj.13819. Epub 2018 Feb 2
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